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離子交換高效液相色譜法分析HbA1c方法的建立

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Johnson
18-5-29 上午6:45 ? 5,937 瀏覽次數(shù)
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Johnson

--Johnson--
北京沫之東生物技術(shù)有限公司
http://www.07315088.cn
2582
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中國
--Johnson--
Johnson
18-5-29 上午6:45

離子交換高效液相色譜法分析HbA1c

當(dāng)葡萄糖在βN-末端結(jié)合形成HbA1c時,血紅蛋白分子發(fā)生構(gòu)象變化,導(dǎo)致分子呈現(xiàn)額外的負電荷。這意味著在離子交換色譜系統(tǒng)中,它將從正常血紅蛋白(HbA0)和通常與HbA0共洗脫的賴氨酸側(cè)鏈糖基化的血紅蛋白中分離出來。

通過對色譜方法和儀器(HPLC)的改進,血紅蛋白被常規(guī)分離成許多峰,如HbA1a,HbA1b,HbF(胎兒血紅蛋白),HbA1c,HbA0,HbA2和一些與其他分子反應(yīng)產(chǎn)生的血紅蛋白產(chǎn)物谷胱甘肽,尿素,阿司匹林等)。

還有一些血紅蛋白降解產(chǎn)物出現(xiàn)在已老化的樣品中。在一些HPLC系統(tǒng)中,這些可能與HbA1c共洗脫或不完全分離。在這些情況下,獲得的HbA1c值可能會高于實際值。新鮮血液樣品含有大量不穩(wěn)定的HbA1c,這些HbA1c在一些較早的分析儀中通過預(yù)孵育步驟被除去。較新的分析儀將不穩(wěn)定形式與穩(wěn)定的HbA1c分開,不需要預(yù)先孵育樣品。

使用離子交換HPLC的平臺包括BioRad D-10,Diastat,Variant,Variant II和Variant Turbo;?TOSOH 2.2 Plus,G7,G8,Menarini Arkray Adams HA 8160.HbA1c對照的完整性對于這些方法更為關(guān)鍵,因為任何降解都會導(dǎo)致可能與HbA1c共洗脫(和共同整合)的干擾峰的增加。由于這個原因,對于這些方法可用的重構(gòu)或開瓶時間可能小于免疫測定程序。


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